Klenow Fragment(3’→5’ exo-)
Klenow Fragment(3'→5' exo-)是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物，具有5'→3'的DNA聚合酶活性，但失去了5'→3'外切核酸酶活性。该酶经突变 (D355A, E357A) 去除了其3'→5'的外切核酸酶活性，所以不适用生成平末端的反应。
特点：
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缺乏3'→5'外切核酸酶活性。
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聚合时可掺入修饰的核苷酸（如Cy3-、Cy5-、氨基、生物素、地高辛和荧光素标记的核苷酸）。
应用：
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随机引物法DNA合成。
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双链DNA 5'突出(5' overhang)末端的标记。
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双脱氧法DNA序列测定（Sanger法）。
来源：
从带有编码DNA聚合酶I基因的 E.coli polA菌株中提取，并利用基因重组技术，使用 E.coli表达和纯化Klenow Fragment(3'→5' exo-)。
活性单位定义：
在37°C条件下，30分钟内能使10nmol 的dNTPs掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。
保存条件：
-20℃保存。
抑制和失活：
抑制剂：金属离子螯合剂，无机焦磷酸盐(PPi)，大剂量的无机磷酸盐(Pi)。
失活： 75°C 20分钟。
质量控制：
相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶污染。
订购信息：
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编号 |
单位活性 |
包装 |
配套提供 |
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EN1001S |
5U/ul |
200U |
10×Reaction Buffer |
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EN1001L |
5U/ul |
1000U |
10×Reaction Buffer |